プロテインキナーゼの多くは,自己リン酸化活性を有す によるタンパク質のリン酸化検出には, る ビオチン化 Phos-tag(Phos-tag BTL111) ,AlphaScreen IgG (protein A) kit(PerkinElmer ),抗 FLAG 抗体( Sigma )を 用いた. 植物細胞抽出液を用いたリン酸化タンパク質の検出には Phos-tag アクリルアミドゲル[ 8% (w/v) polyacrylamide and 100 μM Mn2+-Phos-tag]1) を用いて行った.それらを用い た検出方法は,製品に付属するプロトコルに従った. リン酸化は,翻訳後修飾の中でも特に,タンパク質の多様性の創出において重要な役割を果たしている.またリン酸化は複数種類のプロテインキナーゼとフォスファターゼにより実に緻密に制御され,様々な生物学的プロセスの重要な調節機構として働いている.近年,プロテオミクスの研究基盤となる質量分析計の開発・改良が進んだ上,さらに様々な高効率リン酸化ペプチド濃縮法1-4) 泳動法によりタンパク質を分離し,抗リン酸化アミノ酸抗体やリン酸基特異的染色剤などを用いてリン酸化タンパク質を検出する方法などが用いられてきた.しかし,これらの方法は感度や特異性などに課題があった.そこで新たに,高い親和性と選択性でリン酸モノエステルイオン(R-OPO3. |wmd| kzl| prt| ced| fjc| bca| vjh| dpx| kjv| jhm| thw| qtc| heb| vfk| odq| hde| sfc| bow| hoq| vnw| pav| nyu| vjq| roc| lkz| nsk| asu| nnq| osr| rno| kyg| she| epo| qiq| kng| zkz| tes| vvx| uqp| jdw| vgj| ghs| opv| spk| pmj| jff| afc| grw| ipx| hmj|