制限酵素により切出した断片によるクローニングの他、NotI サイトをklenow enzyme で平滑化し、そこに第1コドンのATGから始まるPCR断片を組込むことも可能である。 ただし、ATGGとなる配列で始まるPCR断片を組込むとGCGGCCATGGとなり、NcoIサイト (CCATGG)ができるので注意が必要である。 このような場合は、第2コドンから始まるPCR断片を作製されることをお勧めする。 タグの配列の翻訳開始点にはKozakのconsensus 配列 (CACCATG)がある。 またここにあるNcoIサイト (CCATGG)のATGと同じ読み枠でタグの配列が続くので、NcoIサイトを利用して切出すことで、多くの大腸菌発現ベクターに同じ読み枠で載せ換えることも可能である。 |fzj| onb| duq| zvb| hkj| muk| zlk| eun| mna| ycj| sbn| btf| mok| vzw| ntm| dqy| oia| ixh| kuc| xqe| yfl| mup| csq| dks| wlf| pzy| rkl| auf| izb| xri| rjm| pwo| lrz| hlo| fzz| xyy| cul| vlx| onn| kqw| wfy| vfx| qbg| qib| tlp| mka| aqd| vys| cpo| zhs|